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生物安全柜性能的評(píng)價(jià)方法

發(fā)表時(shí)間:2020/12/7  |  點(diǎn)擊率:1624

1、柜體防泄漏性
柜體防泄漏測(cè)試有兩種方法,即壓力衰減法和肥皂泡法。壓力衰減法測(cè)試:將安全柜的前窗和排風(fēng)口封閉,柜體內(nèi)加壓到500Pa,保持30min后,測(cè)試柜內(nèi)氣壓,防泄漏性能良好的安全柜內(nèi)壓力應(yīng)不低于450Pa。肥電泡法測(cè)試:將安全柜的前窗和排風(fēng)口封閉,沿安全柜壓力通風(fēng)系統(tǒng)的所有焊縫、套接處和封口處的外表面噴或涂刷肥皂溶液,同時(shí)柜內(nèi)加壓到500Pa,觀察是否有氣泡產(chǎn)生。如果發(fā)生大的泄露,可通過輕微的氣流感覺和聲音發(fā)現(xiàn)。壓力衰減法使用壓力計(jì)或壓力傳感器系統(tǒng)測(cè)試,可以定量檢測(cè)柜體的密封性,是測(cè)試柜體防泄漏準(zhǔn)確、要求高的一種測(cè)試方法。肥皂泡法測(cè)試效果不如壓力衰減法準(zhǔn)確可靠。
2、高效過濾器完整性
高效過濾器主要起到過濾細(xì)菌、氣溶膠和灰塵顆粒的作用,凈化吹入安全柜工作區(qū)和排放出的氣體。高效過濾器的完整性是安全柜檢測(cè)的重要指標(biāo)。高效過濾器的檢測(cè)需要?dú)馊苣z發(fā)生器和光度計(jì)兩個(gè)設(shè)備。氣溶膠發(fā)生器用以產(chǎn)生氣溶膠顆粒,光度計(jì)用以測(cè)試高效過濾器的過濾效率。
(1)可掃描檢測(cè)的過濾器。運(yùn)行安全柜,去掉過濾器的散流裝置和保護(hù)蓋,安放氣溶膠發(fā)生器,將氣溶膠(其光散射強(qiáng)度至少應(yīng)等于10ug/L DOP產(chǎn)生的光散射強(qiáng)度)導(dǎo)入安全柜,產(chǎn)生均勻分布的高效過濾器上游氣流。光度計(jì)探頭在過濾器下游距過濾器表面不超過25mm,以小于50mm/s的掃描速率移動(dòng),使探頭掃測(cè)過濾器的整個(gè)下游側(cè)和每個(gè)組合過濾片的邊緣,掃測(cè)路線應(yīng)略微重疊。圍繞整個(gè)過濾器外圍,沿組合過濾片和框架的連接處以及圍繞過濾器和其它部件之間的密封處仔細(xì)掃測(cè)。所有檢測(cè)點(diǎn)的漏過率不超過0.01%。
(2)不可掃描檢測(cè)的過濾器。對(duì)于經(jīng)管道排氣的安全柜,在下游氣流的管道上鉆一個(gè)直徑大約10mm的孔,將帶有硬管光度計(jì)探針插入孔中進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)點(diǎn)的漏過率不大于0.005%。
3、噪聲
打開安全柜的風(fēng)機(jī)和照明燈,使用聲級(jí)計(jì)測(cè)量安全柜前面中心水平向外30mm、工作臺(tái)面上方380mm處噪聲;關(guān)閉風(fēng)機(jī)和照明燈,測(cè)量相同位置背景噪聲。安全柜的噪聲不超過67dB。
4、照度
在安全柜工作臺(tái)面上,沿臺(tái)面兩內(nèi)側(cè)壁中心連線設(shè)置照度測(cè)量點(diǎn),測(cè)量點(diǎn)之間的距離不超300mm,與側(cè)壁小距離為150mm;關(guān)掉安全柜的燈,使用照度計(jì)從一側(cè)起依次在測(cè)量點(diǎn)測(cè)量背景照度,平均背景照度應(yīng)在(110±50)lx;打開安全柜的燈,啟動(dòng)風(fēng)機(jī),依次在測(cè)量點(diǎn)測(cè)量照度。安全柜平均照度不應(yīng)小于650lx,每個(gè)照度實(shí)測(cè)值不小于430lx。
5、振動(dòng)
將振動(dòng)儀的傳感元件固定在工作臺(tái)面的幾何中心,測(cè)量安全柜正常工作時(shí)的總振動(dòng)振幅。關(guān)閉安全柜的風(fēng)機(jī)(室外風(fēng)機(jī)工作),測(cè)定背景振動(dòng)振幅。安全柜在頻率10Hz~10kHz的凈振動(dòng)振幅(總振動(dòng)振幅減背景振動(dòng)振幅)不超過5um。
6、人員、產(chǎn)品與交叉污染保護(hù)
人員保護(hù)有2種檢測(cè)方法:微生物法和碘化鉀法。微生物法需制備枯草芽孢、桿菌芽孢,測(cè)試后要經(jīng)過細(xì)菌培養(yǎng),操作復(fù)雜,用時(shí)較長(zhǎng),不便于外出開展檢測(cè)。碘化鉀法是定義在EN 12469:2000上的,測(cè)試方法與微生物法相同,用碘化鉀代替了細(xì)菌,可當(dāng)場(chǎng)驗(yàn)證安全柜污染控制性能,操作性強(qiáng),用時(shí)較短。
(1)微生物法
將盛有5*108~8*108個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器放在安全柜內(nèi),噴霧器噴嘴的軸線在工作臺(tái)面上方360mm處,噴嘴前端位于前窗操作口內(nèi)100mm處,噴霧方向平行于臺(tái)面且正對(duì)操作口;噴霧器的圓筒固定在臺(tái)面上的中心,一端貼住工作區(qū)的后壁,另一端從操作口伸出安全柜至少150mm,圓筒的軸線高于臺(tái)面70mm;6個(gè)撞擊采樣器呈左右對(duì)稱放置在柜前,6個(gè)采樣口正對(duì)安全柜;1個(gè)陽(yáng)性對(duì)照瓊脂培養(yǎng)皿放在圓簡(jiǎn)下;2個(gè)狹縫采樣器的采樣口平面與臺(tái)面平行,采樣口的垂直軸線在安全柜前方150mm處,各距內(nèi)側(cè)壁200mm;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。測(cè)試持續(xù)30min。在無菌的條件下,用濾膜濾取所有撞擊采樣器的采樣液體,將濾膜置于培養(yǎng)基上;有濾膜的培養(yǎng)基、對(duì)照培養(yǎng)皿和狹縫采樣器的培養(yǎng)皿在37℃下培養(yǎng),培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,繼續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),從全部撞擊采樣器收集的芽孢菌菌落數(shù)應(yīng)不超過10cfu/次,狹縫采樣器的培養(yǎng)皿收集的芽孢菌菌落數(shù)應(yīng)不超過5cfu/次,對(duì)照皿應(yīng)呈陽(yáng)性(>300cfu)
(2)碘化鉀法
將氣霧發(fā)生器放置在安全柜的工作臺(tái)面上,使氣霧發(fā)生器圓盤的中心位于儀器模擬臂的中心上,圓盤的邊緣到安全柜平面開口的距商是110mm,圈盤與安全柜開口上邊緣平行。氣霧發(fā)生器產(chǎn)生霧狀的碘化鉀微小液滴,安全柜外模擬臂上的4個(gè)空氣采樣器采集從安全柜內(nèi)逃逸出的碘化鉀微粒。采樣結(jié)束后,取出采樣器內(nèi)的過濾薄膜,將薄膜放到PdC12溶液中顯色,計(jì)數(shù)薄膜上灰棕色的小圓點(diǎn)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用碘化鉀法測(cè)試,保護(hù)因子應(yīng)不小于1*105,即每個(gè)薄膜上灰棕色的小圓點(diǎn)數(shù)都應(yīng)小于62個(gè)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)5次,每次均應(yīng)符合要求。
在產(chǎn)品保護(hù)中,在安全柜的工作臺(tái)面上排滿敞開的瓊脂培養(yǎng)皿;圓筒固定在臺(tái)面上的中心區(qū),一端貼住工作區(qū)的后壁,另一端從前窗操作口伸出安全柜至少150mm,.圓筒的軸線高于臺(tái)面70mm;盛有5*106~8*106個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器放在柜外,噴霧器噴射軸在安全柜中心并與操作口上沿平齊,噴霧器的噴嘴前端位于操作口外100mm,噴霧方向平行于臺(tái)面,正對(duì)操作口;一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照瓊脂培養(yǎng)皿放在圓筒下;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。噴霧器關(guān)閉5min后蓋上瓊脂培養(yǎng)皿的蓋子;將培養(yǎng)皿在37℃下培養(yǎng),培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,繼續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),菌落數(shù)應(yīng)不超過5cfu/次,對(duì)照皿應(yīng)呈陽(yáng)性。
對(duì)于交叉污染保護(hù),將盛有5*104~8*104個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器置于安全柜內(nèi),緊靠左側(cè)內(nèi)壁的中心,噴霧器噴射軸線在工作臺(tái)面上30~76mm處,噴射方向平行于臺(tái)面,正對(duì)對(duì)面的側(cè)壁;兩排對(duì)照培養(yǎng)皿位于噴嘴下方,距噴霧器所在側(cè)壁360mm處放一排培養(yǎng)皿,距噴霧器所在側(cè)壁360mm外放一排培養(yǎng)皿;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。 15min后蓋上培養(yǎng)皿,在37℃下培養(yǎng)。將噴霧器放于靠右側(cè)內(nèi)壁中央重復(fù)測(cè)量。培養(yǎng)基培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,維續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),菌落數(shù)應(yīng)不超過2cfu/次。
7、下降氣流流速
Ⅱ級(jí)安全柜下降氣流流速應(yīng)為0.25~0.5m/s。下降氣流流速應(yīng)在標(biāo)稱值士0.015m/s。均勻下降氣流的安全柜,各測(cè)量點(diǎn)實(shí)測(cè)值與平均流速相差均應(yīng)不起過±20%或±0.08m/s。非均勻下降氣流的安全柜各區(qū)域?qū)崪y(cè)的下降氣流流速應(yīng)為其區(qū)域下降氣流標(biāo)稱值±0.015m/s,各測(cè)量點(diǎn)實(shí)測(cè)值與其區(qū)域平均流速相差均應(yīng)不超過±20%或±0.08m/s。
(1)均勻下降氣流的安全柜
在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上,用風(fēng)速儀多點(diǎn)測(cè)量穿過該平面的下降氣流流速。測(cè)量區(qū)域邊界與安全柜的內(nèi)壁及前窗操作口的距離為150mm;測(cè)量點(diǎn)少應(yīng)有3排,每排少應(yīng)有7個(gè)測(cè)量點(diǎn),測(cè)量點(diǎn)等距分布,形成的正方形柵格不大于150mm*150mm。
(2)非均勻下降氣流的安全柜
在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上,用風(fēng)速儀多點(diǎn)(測(cè)量點(diǎn)間距不大于100mm)測(cè)量穿過該平面各區(qū)域的下降氣流流速。

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